Sarjalaimennusten suorittaminen

Sisältö

• vaiheet
• Menetelmä 1 Suoritetaan yksinkertainen laimennus
• Menetelmä 2 Laske lopullinen laimennuskerroin ja pitoisuus

Kemiassa laimennus koostuu tietyn liuoksen konsentraation vähentämisestä. Sarjalaimennus on yksinkertaisesti alkuperäisen liuoksen toistuva laimennus laimennuskertoimen nopeasti monistamiseksi. Tämäntyyppinen laimennus suoritetaan usein kokeissa, joissa vaaditaan erittäin laimennettuja liuoksia ja suurta tarkkuutta, kuten sellaiset, joissa käytetään konsentraatiokäyrät log-asteikolla tai sellaiset, jotka mahdollistavat bakteerien tiheyden laskemisen tietyissä väliaineissa. Ne suoritetaan usein biokemiassa, mikrobiologiassa, farmakologiassa tai kemiassa.

vaiheet

Menetelmä 1 Suoritetaan yksinkertainen laimennus

1. 
   

   
   Määritä oikea laimentava neste (tai laimennusaine). Laimennusaineen valinta on erittäin tärkeä ja riippuu liuoksesta, jonka haluat laimentaa. Laimennusaine on usein tislattua vettä, mutta se ei ole systemaattista. Siten bakteereja tai soluja sisältävän liuoksen kanssa käytetään sen sijaan viljelyväliainetta. Sarjalaimennusta varten samaa laimenninta käytetään kaikissa putkissa.
   • Jos et ole varma, mitä laimenninta käytetään, hanki apua pätevältä henkilöltä tai etsi Internetistä, mitä ihmisten on tehtävä samanlaisen kokemuksen saamiseksi.

2. 
   

   
   
   
   Valmistetaan useita koeputkia, jotka sisältävät 9 ml laimennusnestettä. Näitä koeputkia käytetään peräkkäisten laimennusten tekemiseen. Periaate on yksinkertainen, otat näytteen lähtöliuosta ja siirrät sen seuraavaan putkeen, ota sitten näyte tästä putkesta laittaaksesi seuraavaan jne.
   • Ennen laimentamisen aloittamista on suositeltavaa tunnistaa etukäteen koeputket, jotta vältetään sekaannukset myöhemmin.
   • Jokaisessa putkessa pitoisuus on kymmenen alhaisempi kuin edellisessä. Ensimmäinen putki sisältää laimennetun liuoksen kymmenennessä, toisessa, sadassa, kolmannessa, tuhannessa ja niin edelleen. Määritä etukäteen laimennusten lukumäärä välttääksesi putkien lisäämisen kuin tarvitaan ja laimennusaineen tuhlaaminen turhaan.

3. 
   

   
   
   
   Valmista koeputki äitiliuoksen kanssa. Lisää vähintään 2 ml. Vähimmäismäärä varastoliuosta sarjalaimennusta varten on yksi millilitra. Annetaan 2 ml mahdollista laimennusta varten. Tämä putki äitiliuosta, voit merkitä sen "SM".
   • Ennen sarjalaimennuksen aloittamista sekoita lähtöliuos hyvin.

4. 
   

   
   Tee ensimmäinen laimennus. Pipetoidaan 1 ml kantaliuosta koeputkeen, jossa on merkintä "SM", ja siirrä tämä määrä merkittyyn koeputkeen. 1/10 joka sisältää jo 9 ml laimennusnestettä. Sekoita homogeenisen liuoksen saamiseksi. Tässä putkessa on nyt 10 ml liuosta: 1 ml kantaliuosta ja 9 ml laimennusnestettä. Tämä uusi ratkaisu on kymmenen kertaa vähemmän keskittynyt kuin edellinen.

5. 
   

   
   Suorita toinen laimennus. Toisessa sarjalaimennoksessa vedetään 1 ml merkittyä putkiliuosta 1/10 ja kaada se putkeen 1/100 joka sisältää jo 9 ml laimennusnestettä. Putki 1/10 on sekoitettu hyvin ennen näytteenottoa. Kun siirto on tehty, sekoita putki hyvin 1/100. Liuos merkitystä putkesta 1/10 on 10 kertaa väkevämpi kuin merkityssä putkessa 1/100.

6. 
   

   
   Toista tämä käsittely tarvittaessa. Tämä menettely voidaan toistaa niin monta kertaa kuin halutaan, kunnes haluttu laimennus saavutetaan. Pitoisuuskäyriä sisältävässä kokeessa voit siten saada sarjan ratkaisuja, joissa on laimennuksia yksikköin, kymmenes (1/10), sadas (1/100) tai tuhannes (1/1000).

Menetelmä 2 Laske lopullinen laimennuskerroin ja pitoisuus

1. 
   

   
   Laske suhde viimeinen laimennus sarjalaimennuksen jälkeen. Laimennoksen kokonaissuhde saadaan kertomalla laimennuskerroin itsestään niin monta kertaa kuin laimennoksia on. Matemaattisesti kaava on seuraava: D_T = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_nkanssa D_T edustavat kokonaislaimennuskerrointa ja D_n, laimennussuhde.
   • Oletetaan siis, että suoritat nesteen 1/10 laimennuksen neljä kertaa peräkkäin. Korvaa kaavassa laimennuskerroin arvolla: D_T = 10 x 10 x 10 x 10 = 10 000
   • Sarjalaimennoksesi neljännen putken lopullinen laimennuskerroin on 1/10 000. Viimeisen putken liuoskonsentraatio on nyt 10 000 kertaa alhaisempi kuin alkuperäisessä liuoksessa.

2. 
   

   
   Määritä liuoksen konsentraatio laimentamisen jälkeen. Jotta liuoksen lopullinen pitoisuus saadaan sarjalaimennuksen jälkeen, sinun on tiedettävä aloituspitoisuus. Kaava on sitten: C_lopullinen = C_alku-/ Akanssa C_lopullinen edustaa laimennetun liuoksen loppupitoisuutta, C_alku-, varastoliuoksen konsentraatio ja D, laimennussuhde määritetään etukäteen.
   • Joten, jos laimennat soluliuosta pitoisuudella 1 000 000 solua / ml ja laimennussuhteesi asetettiin arvoon 1 000, mikä on laimennetun näytteen lopullinen konsentraatio?
   • Käytä kaavaa:
     • C_lopullinen = C_alku-/ A
     • C_lopullinen = 1 000 000/1 000
     • C_lopullinen = 1000 solua / ml

3. 
   

   
   Kiinnitä huomiota käytettyihin yksiköihin. Kun teet laskelmia, tarkista aina, että käytät samoja yksiköitä. Siten, jos aloitat solujen pitoisuudesta ml: aa kohti, lopputuloksesi on myös soluissa / ml. Jos aloituskonsentraatio on miljoonasosina (ppm), lopullinen konsentraatio on miljoonasosina.